Laporan Praktikum Kromatografi Kolom

 

LAPORAN  PRAKTIKUM KIMIA ORGANIK I

KROMATOGRAFI KOLOM

 

NAMA                     : Novia Rahmadhani

NIM                         : A1C119023

 

DOSEN PENGAMPU :

Dr.Drs. SYAMSURIZAL, M.Si.

 

 

 

 

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIA

JURUSAN PENDIDIKAN MATEMATIKA DAN ILIMU PENGETAHUAN ALAM

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS JAMBI

2021

VII.  DATA PENGAMATAN          

 

Perlakuan	Fungsi alat dan bahan	Tujuan	Hasil
Dicampurkan n-heksana dengan etil asetat dengan perbandingan 4:1	Cawan porselin : Wadah yang digunakan saat menimbang silica gel   Timbangan elektrik : Untuk mengetahui massa dari silica gel yang digunakan   Erlenmeyer : Untuk mecampurkan silica gel dengan fase gerak.	Untuk membuat eluen (fasa gerak)	Eluen siap digunakan
Ditimbang silica gel sebanyak 50 gram		Untuk menimbang silica gel yang akan digunakan	Didapat bobot silica gel sebanyak 50 gram
Dimasukkan silica gel ke dalam erlenmeyer		Pengadukan berfungsi untuk membantu silica gel terbasahi secara merata dengan eluen	Larutan menjadi berwarna putih keruh
Ditambahkan fase gerak hingga semua silica gel terbasahi kemudian diaduk dan ditutup dengan alumunium foil
Dituang campuran silica gel dengan eluen ke dalam kolom dengan bantuan corong gelas	Gelas kimia : wadah penampung eluen.	Untuk melarutkan silica gel	Larutan menjadi jernih
Dibuka stopper di bagian bawah kolom untuk mengeluarkan eluen. Jika masih ada sisa silica gel dalam labu Erlenmeyer, ditambahkan lagi eluen dan masukkan dalam kolom	Erlenmeyer :sebagai wadah larutan dari campuran silica gel dan fase gerak
Ditutup stopper di bagian bawah kolom		Agar eluen tidak keluar lagi
Dipastikan eluen dalam kolom terisi penuh, kemudian tutup dengan alumunium foil dan rekatkan dengan karet gelang	Alumunium foil :Untuk menjaga eluen supaya tidak terkena zat lain ataupun ada gangguan dari laur	Agar kolom tidak kering selama penyimpanan	Kolom siap digunakan
Didiamkan selama 1-2 jam sebelum digunakan		Untuk menyiapkan kolom yang akan digunakan
Disiapkan 0,5 gram ekstrak rimpang kencur dan 0,5 gram silica gel lalu ditambahkan silica gel sedikit demi sedikit ke dalam ekstrak lalu diaduk dan menjadi serbuk	Ekstrak rimpang kencur : Sebagai sampel	Penyiapan sampel	Sampel berbentuk serbuk berwarna oranye
Dibuka penutup alumunium foil dari kolom dan dikeluarkan eluen dari kolom dengan cara membuka stopper dari bagian bawah kolom	Kolom : tempat terjadinya kromatografi	Untuk memasukan sampel kering kedalam kolom	-
Dikeluarkan eluen hingga batas 0,5 cm dari permukaan atas fase diam lalu stopper ditutup	Kolom : tempat terjadinya kromatografi	Untuk membuang eluan untuk tahap selanjutnya	-
Dimasukkan sampel kering ke dalam kolom dan pastikan sampel terdistribusi merata di atas kolom	Kolom : tempat terjadinya kromatografi	untuk melindungi bentuk lapisan organik	Terbentuk dua lapisan, bagian atas berwarna oranye, bagian bawah berwarna putih keruh
Disiapkan silica gel sebanyak 0,5 gram dan masukkan ke dalam kolom	Kolom : tempat terjadinya kromatografi   Pipet Pasteur : Untuk memindahkan eluen ke kolom	Untuk melindungi ekstrak supaya tetap rata pada saat ditambahkan eluen	-
Ditambahkan eluen melalui dinding kolom dengan pipet Pasteur
Dialirkan eluen dan tampung dalam beaker. Beberapa ml eluen yang keluar pertama kali dari kolom dapat dibuang	Beaker : wadah penampung eluen	Beberapa ml eluen yang keluar pertama kali belum mengandung senyawa kimia dari estrak jadi dapat dibuang
Ditampung fraksi dalam vial yang sudah ditara sebanyak 10 ml dan sudah ditandai nomor dan dibiarkan hingga sebagian besar eluen menguap	Vial:botol kecil untuk menampung fraksi yang dibuat tadi	Untuk melihat apakah setiap botol dapat memperoleh isolat yang di targetkan.	Dan didapatkan 30 buah vial atau botol kecil
Dilakukan monitoring hasil kromatografi kolom dengan KLT	KLT:untuk melihat fase gerak yang terjadi di setiap fraksi yang diteteskan UV:sebagai empat untuk mengamati dengan besar UV 254 nm	Untuk mendapatkan isolat yang di targetkan yaitu senyawa yang sama dengan standar	Dari hasil penggabungan di preoleh 7 fraksi Fraksi 1 :botol 1 Fraksi 2: botol 2 Fraksi 3: botol 3-4 Fraksi 4:botol 5-10 Fraksi 5:botol 11-16 Fraksi 6:botol 17-24 Fraksi 7:botol 25-30 Dan EPMS(Etil p-metoksisinamat)terdapat pada fraksi  nomor 4 dan nomor 5

 

 

VIII.  PEMBAHASAN

Kromatografi kolom merupakan jenis kromatografi yang umumnya memanfaatkan gravitasi dalam pemisahan senyawanya. Prinsip yang digunakan pada kromatografi kolom yaitu memisahkan senyawa berdasarkan kepolaran dan juga ukuran partikel. Selain itu, kecendrungan komponen untuk terdistribusi dalam fasa diam dan fasa gerak yang dipengaruhi oleh gravitasi juga merupakan prinsip dari kromatografi kolom ini.

Pada percobaan ini, fasa diam yang digunakan adalah silica gel dan untuk fasa geraknya digunakan campuran antara n-heksana dengan etil asetat dengan perbandingan 4:1. Cara yang digunakan untuk fasa diamnya adalah dengan cara basah dimana silica gel dilarutkan terlebih dahulu dengan fasa geraknya agar pemisahannya dapat terjadi dengan baik dan lebih cepat ketika sampel melewti fasa diam. Sebelum dilakukan percobaan, hal yang perlu diingat yaitu kolom harus terlebih dahulu dijenuhkan menggunakan fasa geraknya. Kemudian pada bagian dasar kolom dapat diberi kapas tipis lalu baru dimasukkan silica gel yang telah tercampur rata dengan eluen atau fasa gerak, kemudian dimampatkan silica tersebut. Sampel yang digunakan pada percobaan ini adalah ekstrak rimpang kencur. Cara penyiapannya yaitu sebanyak 0,5 gram ekstrak rimpang kencur ditambahkan dengan 0,5 gram  silica gel sedikit demi sedikit ke dalam ekstrak lalu diaduk dan menjadi serbuk. Kemudian ditambahkan eluen atau fasa geraknya yaitu n-heksan : etil asetat dan hasil isolasi ditampung pada masing-masing vial yang telah dikalibrasi. Hasil isolasi didapat 30 buah vial yang kemudian digunakan pada uji KLT untuk mendapatkan senyawa tunggal.

 

IX.  PERTANYAAN

1.      Mengapa ekstrak rimpang kencur harus ditambahkan dengan silica gel? Apakah perbandingannya harus 1:1?

2.      Mengapa pada percobaan ini eluen yang digunakan adalah campuran dari n-hexane dan etil asetat dengan perbandingan 4:1?

3.      Apakah perbedaan antara kromatografi kolom dan kromatografi lapis tipis? Apakah keduanya dapat saling berkaitan?

X.    KESIMPULAN

Prinsip kerja dari kromatografi kolom yaitu memisahkan komponen secara selektif berdasarkan sifat fisik absorbs dengan fase stasioner (diam) berupa absorben silica gel yang mengisi kolom dan fase mobile (gerak). Dalam percobaan ini n-hexane berfungsi sebagai pelarut supaya homogen yang bersifat non polar dan etanol bersifat polar. Dari hasil analisa bisa disimpulkan bahwa partikel yang sama dengan kolom akan tertahan dan sebaliknya partikel yang kepolarannya berbeda dengan kolom akan terus mengikuti aliran

 

XI.  DAFTAR PUSTAKA

Gholib, Ibnu Gandjar., Rohman, Abdul. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar

Hendayana, Sumar. 2006. Kimia Pemisahan. Bandung: PT. Remaja Rosdakarya.

Yazid, Estien. 2005. Kimia Fisika Paramedis. Yogyakarta: Andi.